臭氧气体杀菌作用实验观察
提要 试验表明,当臭氧浓度为 0.028mg/L 作用 60 分钟,可将物体表面细菌繁殖体杀灭 99.9% 以上;臭氧浓度为 0.425mg/L 作用 60 分钟时,可将空气中自然菌杀灭 90.47% 。
关键词 臭氧 空气消毒 表面消毒
臭氧为广谱高效杀菌剂。国外最早用于水的消毒,我国近年对其气体消毒的应用日渐广泛。为确证其杀菌作用,在实验室内进行了有关研究,现将结果报告于下。
方 法
试验分两部分,一为表面消毒试验,一为空气消毒试验。前者在装有臭氧发生器的 JR-90-XB型电子盒(臭氧发生器功率为6W)中进行,后者则以JR-88-M型臭氧发生器(功率为15W)在室内进行。两种臭氧消毒设备均为金华消毒灭菌设备厂产。
臭氧量的测定
将直径为 3mm塑料管插入臭氧熏蒸消毒空间。当到达规定的各工作时间,用注射器分别抽取50ml气体样本,注入吸收液内。吸收液装于吸收管内,为含1%碘化钾的0.1M磷酸盐冲液(PH6.8)。在30分钟内以721型分光光度计(波长未352mm)测定样本的吸光度,与标准曲线对比,计算出臭氧浓度 [3] 。
表面杀菌试验
取无菌平皿,各滴加菌液 0.5ml,在皿底涂布均匀,置37℃温箱干燥10分钟备用。每个平皿滴加一种菌。所用菌液有:金黄色葡萄球菌(ATCC638)、大肠杆菌(ATCC25922)、伤寒杆菌(H901)、痢疾杆菌(杭州市站)与枯草杆菌黑色变种(ATCC9372)芽孢。另取无菌平皿按上法滴加乙型肝炎阳性病人血清并使干燥。每平皿滴加血清量为0.1ml。
将 染 菌 (或 HBsAg)平皿置JR-90-XB型电子保鲜盒内进行消毒处理。到规定作用时间后取出平皿,滴加无菌生理盐水1ml,使菌液重新悬浮,作琼脂倾注培养,并计数每个平皿菌落数。HBsAg样本则以RPHA法测定其残留滴度。
空气消毒试验
在关闭门窗的房间内,用 JR-88-M型臭氧发生器进行消毒。消毒前后进行空气中自然菌采样以测定消毒效果。空气采样用平板沉降法,即在室内5个不同位置各放1个不加盖琼脂平板,采样15分钟。样本置37℃温箱培养24小时观察菌落生长数。
结 果
消毒时臭氧的浓度
在表面消毒与空气消毒时,分别采样测定了在保鲜盒(容积 88L)与试验房间内(面积为14m 2 ,容积为42m 3 )内臭氧的浓度。保鲜盒内装有JR-90-XB型臭氧发生器一个,试验房间内放置JR-88-M臭氧发生器一台。结果表明,空气中臭氧的浓度随臭氧发生器工作时间的延长而增加(表1)。保鲜盒中浓度之所以偏低,一方面因发生器的功率较小,一方面其密闭性较差。
表 1 消毒时空气总臭氧浓度测定结果
Table 1 The ozone concentration in air during disinfection
|
臭氧发生器工作时间 |
空气中臭氧浓度 Concentration of ozone in air (mg/L) |
|
|
表面消毒 |
空气消毒 |
|
|
10 |
0.015 |
0.139 |
|
20 |
0.025 |
0.300 |
|
30 |
0.027 |
0.357 |
|
60 |
0.028 |
0.425 |
表面杀菌作用
在保鲜盒内观察了 3 种作用时间的杀菌效果,每种时间放置了 2 个染菌平皿。试验时,室温为 25 ℃,相对湿度为 85% 。结果表明,臭氧对 4 种细菌繁殖体的杀灭作用相似,作用 60 分钟可达 99.9% 以上,对细菌芽孢的杀灭作用较差(表 2 ),对 HBsAg 的破坏作用,作用 60 分钟仅减少 75.0% (表 3 )。
表 2 JR-90-XB 型电子保鲜盒臭氧杀菌作用
Table 2 The bactericidal efficacy of ozone produced by ozone disinfection box (JR-90-XB)
|
细菌 |
作用不同时间( min )的杀灭率 |
||
|
20 |
30 |
60 |
|
|
金黄色葡萄球菌 |
99.51(31/6370) |
99.86(12/6100) |
99.91(5/5620) |
|
大肠杆菌 |
99.06(70/7450) |
99.76(16/6840) |
99.95(3/6080) |
|
伤寒杆菌 |
99.65(20/5760) |
99.76(12/5160) |
99.93(3/4680) |
|
福氏痢疾杆菌 |
99.62(30/8100) |
99.86(10/7380) |
99.97(2/6840) |
|
枯草杆菌黑色变种芽孢 |
94.78(240/4600) |
94.909(230/4510) |
96.10(175/4490) |
注:括弧内的分母为消毒前每个平皿所含细菌数( cfu ),分子为消毒后每个平皿所含细菌数( cfu ) .
Note : The denominators of the figures in parentheses are the bacterial counts (cfu / dish) before disinfection , the numerators are those (cfu / dish)after disinfection.
表 3 JR-90-XB 型电子保鲜盒中臭氧对 HBsAg 的破坏作用
Table 3 The destructive effect of ozone produced by ozone disinfection box
(JR-90-XB)on HBsAg
|
臭氧作用时间 |
HBsAg 滴度 |
HBsAg 减少率 |
|
0 |
1 : 256 |
… |
|
10 |
1 : 256 |
0.0 |
|
20 |
1 : 128 |
50.0 |
|
30 |
1 : 64 |
75.0 |
|
60 |
1 : 64 |
75.0 |
空气消毒效果
在体积为 42.84m 3 的门窗密闭房间内,放置 JR-88-M 型臭氧发生器一台,进行空气消毒。经开机 60 分钟,空气中自然菌可减少 90.47% (表 4 )。
表 4JR-88-M 臭氧发生器对空气的消毒效果
Table 4 Efficacy of ozone generator (JR-88-M) in disinfection of air
|
作用时间 |
空气总菌量 |
杀灭率 |
|
30 |
11 |
73.8 |
|
45 |
5 |
88.09 |
|
60 |
4 |
90.47 |
注:空气总菌量指 5 个平皿采样所得菌落总数 . 消毒前对照采样,空气总菌量为 42cfu 。
Note : The total bacterial count of air denotes the total number of colonies 5 agar plates used for air sampling. The total bscterial count of air before disinfestion wad 42 cfu .
结 语
本研究结果初步表明,在 JR-90-XB 型电子保鲜盒中用臭氧进行熏蒸处理,对物体表面的细菌繁殖体与芽胞以及 HBsAg 均有一定的杀灭与破坏作用,其中尤以对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌与福氏痢疾杆菌的效果为好,当臭氧量为 0.028mg/L 时,作用 60 分钟可杀灭 99.9% 以上。使用 JR-88-M 型臭氧发生器在 42m 3 容积房间内进行空气消毒,作用 60 分钟,亦可使自然菌下降 90.47% 。

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